Estudios preliminares para la determinación de estrógenos esteroidales por cromatografía líquida

Resumen

Los estrógenos esteroideos son hormonas secretadas por los seres humanos y animales para la regulación del sistema reproductivo. A su vez, han sido sintetizadas artificialmente para el consumo humano, siendo prescritas para el control natal, la regulación de estrógenos en mujeres, el tratamiento de diversos tipos cáncer, reducción de síntomas en la menopausia, prevención de la osteoporosis, desordenes neurológicos, etc. Entre tales compuestos están la estrona, el 17α-estradiol, el 17β-estradiol, el estriol y el 17α-etinilestradiol, siendo este último de origen sintético. En este trabajo, se presentan resultados preliminares para la puesta a punto de la cuantificación de estrógenos en formulaciones farmacéuticas mediante cromatografía de líquidos con detección fotométrica. Inicialmente, se extrajeron los principios activos de las formulaciones farmacéuticas en distintas condiciones experimentales, dependiendo de las características de la matriz. Posteriormente se filtraron e inyectaron en una columna cromatográfica de C₁₈ para su separación en la modalidad de fase reversa con gradiente, usando distintas mezclas de CH₃CN/H₂O y CH₃OH/H₂O. De acuerdo con los resultados obtenidos, la fase móvil con CH₃CN presentó una línea base sin deriva, con picos cromatográficos simétricos y con mayor resolución que CH₃OH, debido a la mayor fuerza eluotrópica del disolvente. En contraste a publicaciones previas de otros autores que utilizan una separación isocrática, en este trabajo se reconocieron mayores ventajas en torno al uso de gradiente, debido a la distinta hidrofobicidad de los analitos abordados. Como con-clusiones, se destaca que se eluyeron los distintos compuestos con tiempos de retención bien diferenciados, no sólo entre los propios analitos, sino respecto a otros principios activos presentes en las formulaciones farmacéuticas.

En este trabajo, se presentan resultados preliminares en el desarrollo de un método analítico basado en cromatografía de líquidos para la cuantificación de estrógenos en formulaciones farmacéuticas. Se realizaron extracciones en diferentes condiciones experimentales según las características de la matriz, seguidas de filtrado e inyección en una columna cromatográfica de C18 en fase reversa con gradiente. Se compararon fases móviles de acetonitrilo-agua y metanol-agua.

Los resultados muestran que la fase móvil con acetonitrilo proporciona mejores picos cromatográficos y mayor resolución que la fase con metanol, debido a su mayor fuerza elotrópica. Se destaca que la separación con gradiente permite una mejor resolución de los analitos en comparación con separaciones isocráticas reportadas en estudios previos. Se concluye que este método permite la cuantificación efectiva de los estrógenos en distintas formulaciones farmacéuticas​.